鮭魚ELISA試劑盒檢測未知抗原的方法
更新時間:2019-04-28 點擊次數:1550
鮭魚ELISA試劑盒常用于檢測ELISA法定量測定血清、血漿或其它相關生物液體中的含量,那么如何使用鮭魚ELISA試劑盒檢測未知抗原,常用的方法有雙抗體夾心法,下面我們來仔細說說。
1. 包被:用0.05M PH9,碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml,在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過一晚上。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml,37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
以上就是鮭魚ELISA試劑盒檢測未知抗原的雙抗體夾心法,希望對大家的檢測有所幫助。